1. Pengenalan
Potassium 4-methoxysalicylate (4MSK), dengan struktur yang serupa dengan asid salisilik, ialah bahan pemutih perubatan baharu yang digunakan dalam kosmetik untuk tindakan pemutihannya dan merupakan ramuan mujarab dalam kosmetik. Ia mempunyai keupayaan untuk meningkatkan keseimbangan warna kulit, melegakan pigmentasi yang berlebihan, membetulkan percambahan atipikal epidermis, menggalakkan perkumuhan melanin dan mencegah jeragat dan bintik-bintik.

2. Fungsi Utama
Pigmentasi, jeragat dan kekurangan kejelasan adalah masalah bagi kebanyakan wanita Asia dan oleh itu produk pencerah kulit sangat menarik minat wanita Asia. Keberkesanan kalium 4-methoxysalicylate telah dikaji oleh syarikat kosmetik terkemuka dan hasilnya ditunjukkan di bawah.
2.1. Perencatan melanogenesis
Sel melanoma tikus (B16) dibiakkan selama tiga hari dengan kehadiran dan ketiadaan 4MSK, dan bilangan sel dan jumlah melanin yang dihasilkan pada bilangan sel tertentu diukur. Nisbah bilangan sel dan jumlah melanin dengan kehadiran 4MSK kepada jumlah melanin tanpa ketiadaan 4MSK diperoleh dan kesan 4MSK terhadap melanogenesis dianalisis dengan cara ini.
Keputusan menunjukkan bahawa bilangan sel dan jumlah melanin selepas 3 hari penambahan 4MSK ditunjukkan dalam Rajah 2. Telah disahkan bahawa 4MSK mempunyai kesan perencatan yang bergantung kepada kepekatan pada melanogenesis, dan keputusan ujian Williams didapati menjadi signifikan secara statistik untuk gugusan penambahan 3 x 10-4 dan 10-3 mol/L jika dibandingkan dengan ketiadaan penambahan 4MSK. Walau bagaimanapun, tiada kesan ke atas percambahan sel ditemui untuk mana-mana kepekatan 4MSK yang diuji.

2.2. Impedans aktiviti kuraminidase
Untuk penilaian aktiviti tyrosinase dalam sistem bukan selular, substrat adalah L-DOPA dan jumlah pengeluaran dopachrome yang terhasil daripada metabolismenya telah diuji oleh ujian penyerapan 475 nm.
Kadar impedans aktiviti tyrosinase oleh 4MSK ditentukan dengan menambahkan larutan 4MSK dan lisat pada sistem tindak balas di atas dan membiarkan campuran ini bertindak balas selama 90 saat pada suhu bilik, menghasilkan nisbah nilai yang diuji apabila larutan 4MSK ditambah berbanding dengan kumpulan lisat.

2.3. Perencatan kesan yang disebabkan oleh UV pada pembezaan keratinosit
Sejurus selepas penyinaran model kulit 3D dengan cahaya UV, larutan 4MSK telah ditambah pada permukaan model kulit, diinkubasi selama 30 minit dan kemudian 4MSK dikeluarkan dan diinkubasi selama 1 hari. Larutan 4MSK telah digantikan dengan medium lisis untuk tujuan kawalan. Model kulit yang disampel selepas pengeraman telah diwarnai dengan antibodi anti-tropin untuk kajian imunohistokimia dan RT-PCR segera (tindak balas rantai transkripsi-polimerase terbalik) untuk kuantifikasi ekspresi mRNA tropin.
Hasil daripada kajian imunohistokimia dengan antibodi anti-trofoblas, model kulit tiga dimensi adalah serupa dengan ujian in vivo, dengan kehadiran protein trofoblas, penanda pembezaan, di sekitar lapisan berbutir. Selepas satu hari pengeraman model kulit ini dalam telaga UV, ekspresi troponin berkurangan. Penambahan 4MSK pada model kulit serta-merta selepas penyinaran UV dengan ketara menekan penurunan yang disebabkan oleh UV dalam ekspresi troponin.
Tambahan pula, analisis PCR kuantitatif RNA yang diekstrak daripada model kulit yang sama menunjukkan bahawa penurunan dalam ekspresi mRNA taurolithionein dalam kumpulan sinaran UV telah ditindas dalam kumpulan 4MSK-tambah. Keputusan yang disahkan oleh kajian imunohistokimia, iaitu penurunan dalam ekspresi troponin pada tahap protein dan penindasan penurunan dalam ekspresi 4MSK, juga disahkan pada tahap mRNA.

2.4 Kesan pertahanan pigmentasi manusia
Dua belas sukarelawan lelaki dewasa yang sihat telah didedahkan kepada panjang gelombang UVA dan UVB di 4 lokasi pada perut selama 3 hari menggunakan sumber cahaya UV tiruan bersamaan dengan lMED (dos eritema minimum) sekali sehari untuk setiap subjek ujian. Empat krim, 1 peratus, 3 peratus, 5 peratus 4MSK dan krim asas digunakan sebagai sampel ujian dan digunakan 3 kali sehari selama 7 hari dari permulaan pendedahan UV. Untuk menilai tahap hiperpigmentasi, ton kulit sebelum dan selepas penggunaan diukur dua kali dengan penguji warna dan dipuratakan untuk mendapatkan jumlah perubahan sebelum dan selepas pendedahan, membandingkan kawasan di mana kepekatan berbeza krim 4MSK digunakan dengan kawasan di mana krim asas telah digunakan.
Kesemua 12 subjek lelaki digunakan sebagai subjek. Purata umur subjek ialah 38.4 tahun. Nilai L* untuk setiap tapak aplikasi sebelum penggunaan artikel ujian ditunjukkan dalam Jadual-la. Nilai L* dianalisis di setiap tapak ujian sebelum artikel ujian digunakan dan mengesahkan bahawa tiada perbezaan warna kulit antara tapak sebelum ujian dimulakan.
Nilai ΔL untuk setiap tapak ujian sebelum artikel ujian digunakan dan 7 hari selepas permohonan ditunjukkan dalam Rajah di bawah. ΔL tapak aplikasi dengan 1 peratus krim 4MSK secara statistik lebih kecil daripada ΔL tapak aplikasi dengan krim asas. Tambahan pula, ΔL menjadi semakin kecil dengan peningkatan kandungan 4MSK, dengan itu menyimpulkan bahawa 4MSK mempunyai kesan anti-pigmentasi yang bergantung kepada dos. Di samping itu, tiada keabnormalan kulit seperti bengkak, kemerahan atau kanser gatal diperhatikan sepanjang tempoh ujian.

2.5. Memperbaiki ketidakseimbangan percambahan dan pembezaan keratinosit dan menggalakkan pelepasan melanin yang lancar
Kajian ke atas melanosit telah menunjukkan perencatan ketara melanogenesis pada kepekatan 3 x 10-4 mol/L, dengan potensi penuh berbanding bahan aktif pemutihan sedia ada. Kajian mengenai mekanisme tindakan perencatan pengeluaran melanin, dan sama ada aktiviti enzim kuraminidase, yang diperlukan untuk pengeluaran melanin, dihalang, telah menunjukkan bahawa 4MSK bukan sahaja menghalang pengeluaran melanin, tetapi juga mempunyai kesan menghalang aktiviti kuraminidase.
Adalah diketahui bahawa penyebab utama pigmentasi adalah cahaya UV, yang menyebabkan keabnormalan sementara dalam ekspresi penanda pembezaan dalam sel pembentuk keratin. Berdasarkan penemuan kami bahawa ketidakseimbangan penanda pembezaan adalah kronik walaupun tanpa penyinaran UV di tapak pigmentasi, kami menjalankan kajian mengenai normalisasi penanda pembezaan oleh 4MSK. Menggunakan model kulit tiga dimensi, kami telah menunjukkan bahawa 4MSK mempunyai kesan pertahanan terhadap ekspresi tidak seimbang tropomiosin, penanda pembezaan keratinosit, pada kedua-dua tahap mRNA dan protein.

Kedua, ujian in vivo telah mengesahkan bahawa produk ujian yang mengandungi 15 peratus 4MSK mempunyai kesan pertahanan bergantung kepekatan terhadap pigmentasi UV. Tiada keabnormalan kulit diperhatikan sepanjang tempoh ujian kerana penggunaan produk ujian yang mengandungi 4MSK, yang menjadikan 4MSK selamat dan berkesan sebagai bahan kosmetik.
Kajian in vitro telah mengesahkan kesan perencatan langsung 4MSK pada melanogenesis dan kesannya terhadap percambahan dan pembezaan sel pembentuk keratin. Kedua-dua tindakan ini mempunyai kesan pertahanan terhadap pengeluaran dan pembebasan melanin, yang menyebabkan deposit melanin berlebihan dalam kulit. Ujian in vivo telah menunjukkan bahawa 4MSK adalah pertahanan yang sangat baik terhadap pigmentasi UV dan oleh itu dipercayai bahawa 4MSK juga berkesan terhadap pigmentasi, jeragat dan kusam dalam bentuk melanin kulit yang berlebihan.

3. Aplikasi

Potassium 4-methoxysalicylate digunakan terutamanya dalam produk kosmetik.

4. Carta Aliran

2,4-Asid dihidroksibenzoik → tambah larutan berair alkali natrium hidroksida → larut → sejukkan → → laraskan PH → mendakan → emparan → bilas → kering → kasar 4-asid methoxysalicylic → haba → kacau → penapis ekstrak → kering → tulen 4-asid methoxysalicylic → laraskan PH → kacau 3 → pulihkan pelarut → sejukkan penghabluran → penapis ekstrak → mentah 4-asid methoxysalicylic kalium → larutkan mentah → nyah warna → penapis ekstrak → sejukkan penghabluran → vakum kering → tulen 4-kalium asid methoxysalicylic

5. Standard Kualiti

Mengikut Piawaian Perusahaan

barang	Spesifikasi	Keputusan
Penampilan	Serbuk putih hingga putih pucat	Serbuk putih
Pengenalan	HPLC, NMR, LC-MS	Mematuhi Standard
Logam berat	Kurang daripada atau sama dengan 20ppm	<20ppm
Sebagai	Kurang daripada atau sama dengan 2ppm	<2ppm
Kerugian pada pengeringan	Kurang daripada atau sama dengan 0.5 peratus	0.29 peratus
Kekotoran tunggal	Kurang daripada atau sama dengan 1.0 peratus	Mematuhi
Assay（HPLC）	Lebih besar daripada atau sama dengan 98.0 peratus	98.56 peratus